校準(zhǔn)準(zhǔn)備

1. 工具與設(shè)備：準(zhǔn)備高精度的標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)，其精度應(yīng)至少比 ABI 熒光定量儀溫度傳感器的精度高一個(gè)量級(jí)，例如標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)精度為 ±0.1℃，以確保校準(zhǔn)的準(zhǔn)確性。同時(shí)，準(zhǔn)備好用于拆卸和安裝溫度傳感器的合適工具，如螺絲刀、鑷子等，以及用于連接溫度傳感器與測量設(shè)備的線纜和轉(zhuǎn)接器。
2. 環(huán)境條件：選擇一個(gè)溫度穩(wěn)定、無明顯氣流干擾的環(huán)境進(jìn)行校準(zhǔn)。理想的環(huán)境溫度應(yīng)接近儀器的正常工作溫度范圍中點(diǎn)，例如若儀器工作溫度范圍為 20℃ – 80℃，則選擇約 50℃的環(huán)境較為適宜。在校準(zhǔn)過程中，保持環(huán)境溫度波動(dòng)不超過 ±0.2℃。
3. 儀器設(shè)置：開啟 ABI 熒光定量儀，進(jìn)入儀器的服務(wù)模式或校準(zhǔn)模式（具體操作方法參考儀器的用戶手冊(cè)）。在該模式下，確保能夠讀取和記錄溫度傳感器的原始數(shù)據(jù)，以及設(shè)置儀器的校準(zhǔn)參數(shù)。

校準(zhǔn)操作流程

1. 初始數(shù)據(jù)記錄：在當(dāng)前環(huán)境溫度下，使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)測量環(huán)境實(shí)際溫度，并記錄該數(shù)值。同時(shí)，在儀器的校準(zhǔn)模式中，讀取并記錄溫度傳感器此時(shí)輸出的原始數(shù)據(jù)，如電阻值或電壓值。
2. 多點(diǎn)校準(zhǔn)：為提高校準(zhǔn)精度，通常選擇多個(gè)溫度點(diǎn)進(jìn)行校準(zhǔn)。例如，在儀器的工作溫度范圍內(nèi)，選取 25℃、50℃、75℃三個(gè)溫度點(diǎn)。通過外部加熱或制冷設(shè)備，將儀器內(nèi)部溫度緩慢調(diào)整至第一個(gè)校準(zhǔn)溫度點(diǎn)，如 25℃。等待溫度穩(wěn)定，一般穩(wěn)定時(shí)間不少于 15 分鐘，期間密切觀察標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)的讀數(shù)，確保溫度在目標(biāo)值 ±0.2℃范圍內(nèi)波動(dòng)。待溫度穩(wěn)定后，再次讀取并記錄標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)的溫度值以及溫度傳感器的原始數(shù)據(jù)。按照相同的方法，依次對(duì)其他校準(zhǔn)溫度點(diǎn)進(jìn)行操作。
3. 校準(zhǔn)曲線繪制：根據(jù)記錄的標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)溫度值和對(duì)應(yīng)的溫度傳感器原始數(shù)據(jù)，利用專業(yè)的數(shù)據(jù)處理軟件或繪圖工具繪制校準(zhǔn)曲線。以溫度為橫坐標(biāo)，溫度傳感器原始數(shù)據(jù)為縱坐標(biāo)，通過線性回歸等方法擬合出一條最佳曲線。例如，若溫度傳感器輸出為電阻值，在校準(zhǔn)曲線上可得到不同溫度下對(duì)應(yīng)的電阻值關(guān)系。
4. 校準(zhǔn)參數(shù)設(shè)置：將繪制好的校準(zhǔn)曲線參數(shù)輸入到 ABI 熒光定量儀的校準(zhǔn)設(shè)置中。儀器通常提供相應(yīng)的界面，用于輸入校準(zhǔn)曲線的斜率、截距等參數(shù)。輸入完成后，保存校準(zhǔn)設(shè)置，并退出校準(zhǔn)模式。

校準(zhǔn)結(jié)果驗(yàn)證

1. 單點(diǎn)驗(yàn)證：選擇一個(gè)未在校準(zhǔn)過程中使用過的溫度點(diǎn)，如 40℃，通過外部設(shè)備將儀器內(nèi)部溫度調(diào)整至該溫度點(diǎn)。等待溫度穩(wěn)定后，讀取標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)的溫度值和儀器顯示的溫度值。對(duì)比兩者，誤差應(yīng)在儀器規(guī)定的允許范圍內(nèi)，如 ±0.5℃。若誤差超出范圍，需重新檢查校準(zhǔn)曲線的繪制和參數(shù)輸入是否正確，必要時(shí)重新進(jìn)行校準(zhǔn)操作。
2. 全程驗(yàn)證：按照儀器的正常工作流程，運(yùn)行一次模擬的 PCR 實(shí)驗(yàn)，設(shè)置實(shí)驗(yàn)過程中的溫度變化涵蓋儀器的工作溫度范圍。在實(shí)驗(yàn)過程中，使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)實(shí)時(shí)監(jiān)測儀器內(nèi)部溫度，并與儀器顯示的溫度值進(jìn)行對(duì)比。觀察整個(gè)溫度變化過程中，儀器顯示溫度與標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)測量溫度的偏差情況，確保溫度偏差在允許范圍內(nèi)，且溫度變化曲線與預(yù)期相符。若驗(yàn)證過程中發(fā)現(xiàn)問題，需進(jìn)一步排查校準(zhǔn)過程中可能出現(xiàn)的錯(cuò)誤，或檢查儀器的硬件和軟件是否存在其他故障。